水质叶绿素a分光光度法的采集保存和测定

        我国测定叶绿素a的方法主要有分光光度法和荧光分光光度法，环境保护部发布的《HJ 897-2017 水质 叶绿素a的测定 分光光度法》、水利部颁布的“水质叶绿素的浓度测分光光度法(SL88-1994现已废止被SL88-2012代替)及海洋监测规范第7部分：近海污染生态调查和生物监测GB17378.7-2007。其中SL88-1994与《水和废水监测分析方法》(第四版增补版)中“叶绿素a的测定方法”在样品处理和计算公式都相同，属干丙酮研磨萃取法。而SL88-2012与GB17378.7-2007在样品处理和计算公式相同，属于丙酮反复冻融-浸提法。

我们的采用了荧光检测技术，该技术是利用浮游植物体内的叶绿素受特定波长的光激发后产生的荧光与其浓度在一定范围内呈线性关系的原理,因此通过检测浮游植物中叶绿素a发出的荧光强度即可实现对浮游植物的定量测定。

水质叶绿素a分光光度法的采集、保存和测定
1、样品采集：样品的采集一般使用有机玻璃采水器或其他适当的采样器采集水面下0.5m样品，湖泊、水库根据需要可进行分层采样或混合采样，采样体积为1L或500ml。如果样品中含沉降性固体( 如泥沙等), 应将样品摇匀后倒入2L量筒，避光静置30min,取水面下5cm样品，转移至采样瓶。在每升样品中加入1ml碳酸镁悬浊液， 以防止酸化引起色素溶解。
注:如果水深不足0.5m.在水深1/2处采集样品，但不得混入水面漂浮物。
2、样品保存：样品采集后应在0C~4C避光保存、运输，24h内运送至检测实验室过滤(若样品24h内不能送达检测实验室，应现场过滤，滤膜避光冷冻运输)，样品滤膜于-20C避光保存，14d内分析完毕。
注:样品采集后，如条件允许，宜尽快分析完毕。
3、样品测定：将一定量样品用滤膜过滤截留藻类，研磨破碎藻类细胞，用丙酮提取叶绿素，离心后于特定波长下测定提取液吸光度，根据公式计算水中叶绿素a浓度。